厭氧培養(yǎng)箱是嚴(yán)格厭氧微生物研究與臨床檢測(cè)的核心設(shè)備，其通過維持O2濃度＜0.1%的穩(wěn)定環(huán)境，保障梭菌、擬桿菌等氧敏感菌的正常生長(zhǎng)。若操作不當(dāng)，極易因微量氧氣滲入、氣體配比錯(cuò)誤或滅菌不到位，導(dǎo)致培養(yǎng)失敗、菌種死亡或交叉污染。掌握
厭氧培養(yǎng)箱規(guī)范使用方法，是實(shí)現(xiàn)無氧、恒溫、潔凈、可控的關(guān)鍵保障。
一、使用前準(zhǔn)備
檢查氣源：確保高純氮?dú)猓∟2≥99.999%）、氫氣（H2）和二氧化碳（CO2）壓力充足（0.2–0.4MPa），管路無泄漏；
啟動(dòng)預(yù)運(yùn)行：開機(jī)后開啟催化除氧系統(tǒng)，通入混合氣（如80%N2+10%H2+10%CO2），運(yùn)行2–4小時(shí)，直至氧濃度≤0.1%；
紫外滅菌：使用前開啟內(nèi)腔紫外燈30分鐘，殺滅殘留微生物。
二、樣品轉(zhuǎn)移規(guī)范（過渡艙操作）
物品預(yù)處理：培養(yǎng)皿、移液器等需提前放入過渡艙，關(guān)閉外門；
抽真空-充氣循環(huán)：執(zhí)行3次“抽真空至–80kPa→充混合氣”循環(huán)，置換空氣；
避免頻繁開關(guān)：?jiǎn)未无D(zhuǎn)移盡量集中，減少主腔體擾動(dòng)。
三、主腔體操作要點(diǎn)
戴好操作手套：檢查丁基橡膠手套無破損、老化，操作時(shí)動(dòng)作平穩(wěn)，避免拉扯；
控制操作時(shí)間：長(zhǎng)時(shí)間操作應(yīng)分段進(jìn)行，防止手部汗氣或微漏累積升高氧濃度；
擺放合理：樣品勿遮擋循環(huán)風(fēng)機(jī)或傳感器，保證溫濕度均勻。
四、運(yùn)行監(jiān)控與維護(hù)
實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)參數(shù)：通過觸摸屏查看O2、溫度、濕度是否在設(shè)定范圍（如37℃、85%RH、O2＜0.1%）；
定期更換催化劑：鈀催化劑壽命約6–12個(gè)月，活性下降時(shí)除氧效率降低；
清潔內(nèi)腔：每周用75%乙醇擦拭不銹鋼內(nèi)壁，避免有機(jī)物堆積。
五、關(guān)機(jī)與長(zhǎng)期停用
先取出所有樣品，關(guān)閉加熱與氣體供應(yīng)；
保持微正壓：充入純N2維持箱內(nèi)正壓，防止空氣倒吸；
干燥存放：放置防潮硅膠，手套口密封。
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